液相色譜(HPLC/UHPLC)分析中，液相色譜柱堵塞是導致系統(tǒng)壓力異常升高、峰形畸變甚至停機的最常見故障之一。其根源多為樣品或流動相中的微粒雜質(zhì)進入柱床。而預防勝于治療——在線過濾器與保護柱正是守護昂貴分析柱的“第一道防線”。 一、堵塞的典型表現(xiàn)與成因
系統(tǒng)壓力持續(xù)上升(如從150 bar升至300 bar以上)；
保留時間漂移、峰分叉或消失；
柱效(N)顯著下降。
主要污染源包括：未過濾的樣品、緩沖鹽結(jié)晶、泵密封磨損顆粒、溶劑瓶底部沉淀等。
二、在線過濾器：攔截流動相雜質(zhì)
安裝在泵與進樣器之間(或自動進樣器出口)，孔徑通常為0.5μm或0.2μm不銹鋼濾片?？捎行V除流動相中的微粒，且可拆卸清洗重復使用。建議每1–2周超聲清洗一次，避免成為堵塞點本身。
三、保護柱：專屬性攔截樣品污染物
保護柱(Guard Column)填充與分析柱相同或相似填料，安裝在進樣器與分析柱之間。其作用是：
吸附樣品中的強保留雜質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等；
防止顆粒物直接沖擊分析柱入口篩板(通?？讖?μm)。
當系統(tǒng)壓力升高10%–15%時，應首先更換保護柱芯(成本僅為分析柱的5%–10%)，而非盲目反沖主柱。
四、綜合防護策略
所有樣品必須經(jīng)0.22μm濾膜過濾；
緩沖鹽流動相使用后立即用高比例水沖洗，再轉(zhuǎn)有機相保存；
長期不用時，將分析柱卸下，兩端密封保存于推薦溶劑中。
某制藥企業(yè)QC實驗室因省略保護柱，半年內(nèi)報廢3根C18柱(單價超萬元)。加裝后，單柱壽命從300針延長至2000針以上，年節(jié)省耗材費用15萬元。
綜上，在線過濾器防“外敵”，保護柱擋“內(nèi)患”，二者協(xié)同構(gòu)建低成本、高效益的色譜柱防護體系。在追求分析效率的同時，絕不能忽視這一看似微小卻至關(guān)重要的細節(jié)。
更新時間：2025-11-24
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